穗花杉ISSR引物反应条件的优化与筛选

编号 zgly0000457391

文献类型 期刊论文

文献题名 穗花杉ISSR引物反应条件的优化与筛选

作者 朱柏芳  朱笃  邓荣根  李思光 

作者单位 江西师范大学生命科学学院/江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室  南昌大学生物工程系 

母体文献 植物研究 

年卷期 2006,26(3)

页码 318-322

年份 2006 

分类号 S565.1  S791.52 

关键词 ISSR  引物筛选  穗花杉 

文摘内容 在研究穗花杉(Amentotaxus aragotaenia)的遗传多样性过程中, 为了获得清晰、重复性好ISSR扩增结果, 对影响ISSR-PCR的多个因素包括模板浓度、Taq酶的选择和用量、Mg^2+和dNTPs浓度及退火温度等指标等进行了筛选和优化, 确定了穗花杉ISSRPCR分析的最适扩增条件: 20μL PCR反应体系中, 2μL 10×Taq酶配套缓冲液, 1.8UTaq聚合酶(上海生工公司), 0.2μmol·L^-1引物, 0.18mmol·L^-1 dNTP, 1.5～2.5mmol·L^-1 MgCl2, 10ng·μL^-1模板DNA。用来自不同居群7个个体, 以100个ISSR引物进行PCR扩增, 筛选出扩增效果较好的10个引物。得到了92个位点, 其中45个多态性位点, 多态性位点比例为49%。