华东黄杉ISSR引物反应体系的优化与筛选

编号 zgly0000539189

文献类型 期刊论文

文献题名 华东黄杉ISSR引物反应体系的优化与筛选

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 刘晓燕  鲁顺保  江玉梅  李思光  朱笃  陈晖 

作者单位 江西师范大学生命科学学院  南昌大学生命科学学院  江西省三清山风景名胜区管理委员会 

母体文献 江西农业大学学报 

年卷期 2007,29(6)

页码 1021-1025

年份 2007 

分类号 S791.16 

关键词 华东黄杉  ISSR  引物筛选 

文摘内容 在研究华东黄杉(Pseudotsuga gaussenii Flous)的遗传多样性过程中，为了获得清晰、重复性好的ISSR扩增结果，对影响ISSR—PCR的多个因素包括模板浓度、Mg^2＋浓度、dNTPs浓度、Taq酶的用量、退火温度和循环次数等指标进行了筛选和优化，确定了华东黄杉ISSR—PCR分析的最佳扩增条件为：20μL PCR反应体系中，2μL10×Taq酶配套缓冲液，1．5UTaq聚合酶(上海Promega公司)，1．5—2．5mmol／L MgCl2，0．2μmol／L引物，0．2mmol／LdNTPs，10ng／L模板DNA。用来自江西三清山的4个个体，以100个ISSR引物进行PCR扩增，筛选出扩增效果较好的12个引物。