伯乐树cpDNA-PCR反应体系的优化与引物筛选

编号 zgly0000828622

文献类型 期刊论文

文献题名 伯乐树cpDNA-PCR反应体系的优化与引物筛选

作者 胡尚力  徐刚标  梁艳  刘雄盛  肖玉菲  郝博搏 

作者单位 中南林业科技大学生命科学与技术学院 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2013(7)

页码 67-71

年份 2013 

分类号 S794.9 Q78 

关键词 伯乐树  cpDNA  PCR体系优化  引物筛选 

文摘内容 伯乐树为国家一级保护植物,在研究被子植物的系统发育和古地理、古气候等方面具有重要的科学价值。cpDNA-PCR反应是在分子水平上确定伯乐树系统分类的基础。建立了伯乐树cpDNA-PCR反应体系,对影响扩增反应的因素(Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度以及模板DNA浓度)进行了优化,得到了伯乐树cpDNA-PCR扩增反应的最佳体系,并筛选出了适合伯乐树分子谱系地理研究的非编码区序列和引物。伯乐树cpDNA-PCR最佳反应体系为: 30μL反应体系含有10×PCR buffer、2.9 mmol Mg2+、120 mmol dNTP、上下游引物各11μmol、DNA模版30 ng以及3个单位的Taq酶。适合于伯乐树分子谱系地理学研究的3对引物及其退火温度为PipetB1411F-PipetD738R(52℃)、psbA-trnHGUG(59℃)、trnL-trnF(56℃)。