珙桐cpDNA非编码序列引物反应条件优化与筛选

编号 zgly0000718128

文献类型 期刊论文

文献题名 珙桐cpDNA非编码序列引物反应条件优化与筛选

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 张玉梅  徐刚标  谷振军  安静 

作者单位 中南林业科技大学林木遗传育种实验室 

母体文献 中南林业科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2011,31(3)

页码 183-186

年份 2011 

分类号 Q51 

关键词 珙桐  cpDNA  非编码序列  引物筛选 

文摘内容 实验采用改良CTAB方法提取总DNA,以珙桐及其近缘种基因组DNA为材料,优化cpDNA非编码序列PCR扩增条件,优据优化的PCR扩增条件,首次筛选出适合于珙桐分子谱系地理学研究的cpDNA非编码序列和引物。结果表明: 25μL PCR反应体系中含有50 ng DNA,10×Buffer,2.5 mmol MgCl2,0.4 mmol dNTPs,0.2μmolpri mer1,0.2μmol pri mer2,1.25 U Pfu DNA Polymerase。适宜的PCR反应程序为94℃5 min,94℃1 min,退火时间45 s,退火温度和72℃延伸时间依不同的引物和产物而不同,35个循环,72℃总延伸7 min。稳定性好的、扩增条带清晰且单一的trn^SGCU和trnG^UUC、F71和R1516、rps16—F和rps16—R、atpB—49和rbcL—188四对引物可作为进一步珙桐分子谱系地理学研究的引物。