家蚕核型多角体病毒Bm90基因缺失对病毒增殖和组装的影响

编号 zgly0001515721

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕核型多角体病毒Bm90基因缺失对病毒增殖和组装的影响

作者 巩成见  田星  蒋磊  于威  舒建洪  吴银丽  童富淡 

作者单位 浙江理工大学生命科学学院  浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室  宁海县动物卫生监督所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2016年03期

年份 2016 

分类号 S884.5 

关键词 家蚕核型多角体病毒  Bm90基因  λRed重组系统  Bac-to-Bac系统  病毒增殖  病毒组装 

文摘内容 家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)基因组中的orf90基因(Bm90)是一个未知功能的保守基因。利用λRed重组系统和Bac-to-Bac系统构建野生型病毒Wt Bacmid-polh-egfp、Bm90基因缺失型病毒Bm90ko-polh-egfpBacmid及Bm90基因补回型病毒Bm90re-polh-egfp-Bacmid,并制备Bm90蛋白的多克隆抗体,研究Bm90基因在病毒感染周期中的表达以及对病毒增殖和组装的影响。将3种重组病毒分别转染Bm N细胞,Western blot检测显示Bm90蛋白在病毒转染Bm N细胞后72 h有表达;但用荧光显微镜观察Bm90基因缺失型病毒转染的Bm N细胞中没有出现绿色荧光,且检测其病毒滴度为0;用透射电子显微镜观察在Bm90基因缺失型病毒转染的Bm N细胞中没有子代病毒粒子出现。研究结果表明,Bm90基因缺失会抑制子代病毒粒子的组装和产生,使病毒失去侵染性,Bm90基因是病毒增殖及组装的必需基因。