Bm59基因缺失对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)复制、转录及组装的影响

编号 zgly0001528374

文献类型 期刊论文

文献题名 Bm59基因缺失对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)复制、转录及组装的影响

作者 蒋磊  田星  巩成见  于威  舒建洪  吴银丽  童富淡 

作者单位 浙江理工大学生物化学研究所  浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室  宁海县动物卫生监督所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2016年02期

年份 2016 

分类号 Q939.4 

关键词 家蚕核型多角体病毒  Bm59基因  λRed重组系统  Bac-to-Bac系统  qRT-PCR 

文摘内容 Bm59是家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)的核心基因之一。利用λRed重组技术和Bac-to-Bac系统构建野生型病毒wt Bacmid-polh-egfp、缺失型病毒Bm59ko-Bacmid-polh-egfp以及补回型病毒Bm59re-Bacmidpolh-egfp,并分别转染家蚕卵巢培养细胞Bm N,研究Bm59基因在病毒侵染、增殖和组装中的功能。对病毒滴度的检测结果表明3种类型病毒都能产生有活力的子代病毒并使细胞感染发病,但Bm59ko-Bacmid-polh-egfp在各个时相的滴度值均显著低于其他2种类型病毒(P<0.05)。电子显微镜下观察Bm59ko-Bacmid-polh-egfp转染的细胞中只有少量细长的杆状病毒粒子,而其他2种类型病毒转染细胞后则能产生大量具有囊膜包裹的成熟病毒粒子。qRT-PCR检测结果显示,Bm59缺失型病毒基因组DNA的复制能力显著降低(P<0.05),早期基因lef-3、晚期基因vp39和极晚期基因p10的转录水平显著低于野生型病毒(P<0.05)。综上所述,Bm59基因虽然是家蚕核型多角体病毒复制的非必需基因,但会显著影响病毒的增殖速度和病毒粒子的组装,对病毒各个时期的基因转录水平具有下调作用。