南方红豆杉ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0000786541

文献类型 期刊论文

文献题名 南方红豆杉ISSR-PCR反应体系的建立与优化

学科分类 220.45;经济林学

作者 廖盼华  汪庆  李亚  姚淦  杨如同  王淑安 

作者单位 江苏省中国科学院植物研究所 

母体文献 林业科技开发 

年卷期 2012,26(2)

页码 29-32

年份 2012 

分类号 S823 

关键词 南方红豆杉  ISSR  体系优化  正交设计 

文摘内容 以南方红豆杉DNA为模板,采用正交试验设计对影响南方红豆杉ISSR-PCR扩增的参数进行了优化。结果表明较佳的南方红豆杉ISSR-PCR的反应体系(20μL)为模板DNA 60 ng,10×PCR buffer 2.0μL,25 mmol/L的MgCl21.0μL,2.5 mmol/L的dNTPs 1.0μL,10μmol/L的引物1.0μL和反应酶0.2 U。适宜的扩增条件为94℃预变性4 min,41个PCR循环(94℃变性30 s,54.5℃退火45 s),72℃延伸80 s,72℃延伸5 min,4℃保存。