一种适用于田间LAMP检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法

编号 zgly0001652501

文献类型 期刊论文

文献题名 一种适用于田间LAMP检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法

作者 史梦玉  林春花  刘文波  缪卫国  郑服丛 

作者单位 海南大学热带农林学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年21期

年份 2018 

分类号 S763.7 

关键词 橡胶树白粉菌  甘油破壁法  DNA  LAMP检测 

文摘内容 为了探索建立一种快速、简便适用于田间LAMP (loop-mediated isothermal amplification)检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法,在无液氮也不需要研磨的情况下,利用渗透压破壁的方法提取橡胶树白粉菌DNA。通过改变渗透压对橡胶树白粉菌DNA进行提取,使用特异性引物OH-666A (5’-ACTGACACCCCAT CACGACTAAAA-3’),OH-666S (5’-CATATTCTCACGAAGGAAAGCATTG-3’)进行PCR扩增,并与试剂盒提取DNA的PCR产物进行比较,对提取的DNA进行LAMP检测。20μL甘油加入600μL ddH2O,离心10 min,去上清,加50μL水离心2 min即可提出橡胶树白粉菌的DNA,PCR扩增能获得清晰目的条带,对得到的扩增产物进行测序,同时对提取的DNA进行LAMP检测,并与实验室常规方法比对,所有结果均一致。破壁法可用于橡胶树白粉菌DNA的快速提取,由于不需要特殊仪器,且快速方便,在田间容易实现,所以更适用于田间橡胶树白粉菌DNA的田间粗提取,对开展橡胶树白粉病田间分子预测提供了技术支持。