稳定表达猪miRNA let-7c细胞株的建立及其对CSFV的调控作用

编号 zgly0001393005

文献类型 期刊论文

文献题名 稳定表达猪miRNA let-7c细胞株的建立及其对CSFV的调控作用

作者 张旭  张彦明  张倩  程媛媛  谭晓妮 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年12期

年份 2010 

分类号 S858.28 

关键词 猪瘟病毒  猪脐静脉血管内皮细胞  miRNA let-7c 

文摘内容 【目的】构建含有let-7c前体基因的重组质粒pGene-pre-let-7c,建立稳定表达猪miRNAlet-7c细胞株,研究let-7c对猪瘟病毒(CSFV)复制的调控作用。【方法】利用RNA22软件筛选出CSFV基因组3′-UTR潜在的let-7c结合位点,PCR扩增出let-7c前体片段,连接到表达载体pGenesil-1.1-dBm2上,构建重组质粒pGene-pre-let-7c,采用脂质体法将重组质粒转染猪脐静脉血管内皮细胞(SUVEC),经G418抗性压力筛选获得阳性细胞株。对获得的阳性细胞株进行接毒试验,检测CSFV的复制情况。用MTT比色法检测阳性细胞的增殖情况。【结果】成功扩增出let-7c前体基因,并构建了pGene-pre-let-7c重组质粒。重组质粒转染SUVEC细胞后筛选获得了稳定表达let-7c的细胞株。let-7c可下调CSFV在细胞中的复制。【结论】let-7c可下调CSFV的RNA复制水平。