甘蓝显性雄性不育基因的延长随机引物扩增DNA(ERPAD)标记

编号 zgly0001204909

文献类型 期刊论文

文献题名 甘蓝显性雄性不育基因的延长随机引物扩增DNA(ERPAD)标记

作者 王晓武  方智远  孙培田  刘玉梅  杨丽梅 

作者单位 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 

母体文献 园艺学报 

年卷期 1999年01期

年份 1999 

分类号 S635.103 

关键词 甘蓝  显性雄性不育基因  分子标记  延长随机引物扩增DNA（ERPAD） 

文摘内容 获得了一个与甘蓝显性雄性不育基因连锁的延长随机引物扩增ＤＮＡ（ＥｘｔｅｎｄｅｄＲａｎｄｏｍＰｒｉｍｅｒＡｍｐｌｉｆｉｅｄＤＮＡ，ＥＲＰＡＤ）标记ＥＰＴ１１９００。ＥＰＴ１１９００是在与甘蓝显性雄性不育基因连锁的ＲＡＰＤ标记ＯＴ１１９００的基础上，通过逐步筛选３’端延长的随机引物的方法转化而成的稳定性和特异性都得到增强的新标记。这种标记的稳定性和特异性接近ＳＣＡＲ标记，但不需要克隆和测序。该方法首先根据ＯＰＴ１１的序列合成３’端添加Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｇ４种碱基的４个引物，组成１０个引物对。以不育池为模板筛选出ＯＴ１１ Ｃ＋ＯＴ１１ Ｇ为唯一能够扩增长度与ＯＴ１１９００相同的一个片段的引物对。在此引物对基础上，又添加４种碱基得到８个新的引物，相互组合成１６个引物对。进一步以不育池为模板筛选出ＯＴ１１ ＣＴ＋ＯＴ１１ ＧＡ，在严格条件下，它可特异扩增长度与ＯＴ１１９００相同的一个片段ＥＰＴ１１９００。通过分离群体分析证实这一片段与ＯＴ１１９００处于同一位点。