青杨脊虎天牛CYP4G2基因片段的克隆、序列分析与表达

编号 zgly0000564465

文献类型 期刊论文

文献题名 青杨脊虎天牛CYP4G2基因片段的克隆、序列分析与表达

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 关桦楠  迟德富  宇佳  李晓灿 

作者单位 东北林业大学生命科学学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2008,51(4)

页码 357-364

年份 2008 

分类号 Q966 

关键词 青杨脊虎天牛  细胞色素P450酶系  CYP4G2基因  克隆  表达 

文摘内容 根据报道的十几种昆虫CYP4家族基因的氨基酸序列保守区域设计一对引物,利用RT-PCR技术扩增编码青杨脊虎天牛Xylotechus rusticus中肠细胞色素氧化酶CYP4G2蛋白的cDNA片段,构建原核表达载体pET-CYP4G2,将其转化入大肠杆菌Escherichia coli JM109中表达。序列分析结果表明,该基因(CYP4G2,GenBank登录号为EF429250)保守区域阅读框全长387bp,编码129个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为16.9kD和5.75;推导的氨基酸序列与已报道的昆虫CYP4家族氨基酸序列一致性较高(63%～86%),且具有细胞色素氧化酶的典型特征。IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳检测到一条22kD大小的外源蛋白,与预测融合蛋白的分子量大小相应。CO差光谱分析证明重组菌表达了有活性的pET-CYP4G2。