棉铃虫组织蛋白酶B多克隆抗体制备及鉴定

编号 zgly0001282917

文献类型 期刊论文

文献题名 棉铃虫组织蛋白酶B多克隆抗体制备及鉴定

作者 安晓萌  邵红莲  杜欣军  赵小凡  王金星 

作者单位 山东大学生命科学学院  山东大学生命科学学院 济南250100  济南250100  济南250100 

母体文献 昆虫知识 

年卷期 2004年02期

年份 2004 

分类号 S435.622 

关键词 组织蛋白酶B  抗体制备  免疫印迹 

文摘内容 介绍了用重组的棉铃虫组织蛋白酶B(HCB)制备兔多克隆抗体的方法。用已经克隆得到的pGEX 4T 1 HCB重组质粒转化的大肠杆菌 (Escherichiacoli)BL2 1菌株进行诱导表达 ,获得融合表达的包涵体产物。经过变性、复性等方法处理包涵体 ,获得可溶性融合蛋白。用凝血酶裂解融合蛋白 ,再经SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化目的蛋白HCB ,用做抗原免疫家兔。产生的抗血清经硫酸铵沉淀 ,最后得到了抗棉铃虫组织蛋白酶B的多克隆抗体。用间接酶联免疫吸附测定法测得该抗体对重组表达的组织蛋白酶B和棉铃虫体内的组织蛋白酶B的效价分别为 1∶5 1 2 0 0和 1∶2 5 60 0。通过免疫印迹检测证明此抗体不仅可以识别重组表达的棉铃虫组织蛋白B ,而且可以识别棉铃虫卵巢匀浆液中的棉铃虫组织蛋白酶B。