线虫surface coat proteins提取方法的建立与双向电泳分析

编号 zgly0000702902

文献类型 期刊论文

文献题名 线虫surface coat proteins提取方法的建立与双向电泳分析

学科分类 220.30;森林保护学

作者 黄薇  田宝玉  郭菁  蔡婉玲  高媛媛  柯崇榕  黄建忠 

作者单位 福建师范大学教育部工业微生物工程研究中心 

母体文献 生物技术 

年卷期 2010,20(2)

页码 30-33

年份 2010 

分类号 Q503 Q959.17 

关键词 线虫  surface  coat  proteins  蛋白提取  双向电泳  MALDI-TOF质谱 

文摘内容 目的: 建立一套适用于蛋白质双向电泳体系的线虫surface coat proteins(SCPs)样品制备技术,为今后研究线虫surfacecoat蛋白质组学及线虫病理生理学奠定基础。方法: 以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为研究材料,对比和分析不同的蛋白提取沉淀方法,进而采用SDS-PAGE电泳技术和双向电泳技术对所提蛋白进行评价。结果: 通过35%乙醇结合TCA-丙酮沉淀法获得的质量较好的线虫SCPs,在12%的SDS-PAGE分析中该法提取的蛋白背景浅,蛋白条带多且清晰尖锐,含有丰富的蛋白信息量。通过双向电泳分析,可从提取的蛋白中鉴定出清晰蛋白点400多个。随机选择5个蛋白斑点,进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定,鉴定得到高度匹配的已知线虫蛋白质2个。结论: 所建立的方法可为今后研究线虫surface coat蛋白质组学及线虫病理生理学提供重要工具。