沙冬青子叶原生质体瞬时表达体系的建立及其AmDREB1蛋白的亚细胞定位

编号 zgly0001645307

文献类型 期刊论文

文献题名 沙冬青子叶原生质体瞬时表达体系的建立及其AmDREB1蛋白的亚细胞定位

作者 楠迪娜  薛敏  唐宽刚  任美艳  王茅雁 

作者单位 内蒙古农业大学生命科学学院 

母体文献 植物科学学报 

年卷期 2018年04期

年份 2018 

分类号 Q943.2 

关键词 沙冬青  原生质体  瞬时表达  DREB转录因子  亚细胞定位 

文摘内容 以沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus(Maxim.ex Kom.)Cheng f.)幼苗的子叶为材料,对其原生质体的分离、纯化和瞬时表达体系进行了研究。结果表明,子叶原生质体分离的最佳酶解液组成为CPW溶液+3.0%纤维素酶R-10+0.5%离析酶R-10+0.3%半纤维素酶+9.0%甘露醇(p H5.8);最佳酶解条件为室温、避光、40 r/min轻摇14 h。采用W5溶液作为漂洗液将酶解物稀释后进行过滤,将过滤液在4℃、700 r/min条件下离心5 min,所得纯化原生质体的产量约为2.50×106cells/g,活力达到90%;以纯化的原生质体作为受体,利用聚乙二醇(PEG)介导法成功将植物瞬时表达载体p BI-GFP导入其中,转化效率达到50.8%。利用本研究建立的原生质体瞬时表达体系,检测到沙冬青脱水应答转录因子Am DREB1定位于细胞核内。