雪松疫霉(Phytophthora lateralis)的快速分子检测

编号 zgly0001467130

文献类型 期刊论文

文献题名 雪松疫霉(Phytophthora lateralis)的快速分子检测

作者 纪睿  王健生  廖太林  李百胜  张正光  郑小波 

作者单位 昆山出入境检验检疫局  南京农业大学植物保护学院/农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 S432.4 

关键词 雪松疫霉  分子检测  PCR 

文摘内容 由雪松疫霉(Phytophthora lateralis)引起的疫病是一类植物检疫性病害。为建立该病原菌的快速检测技术,本文比较分析了雪松疫霉和其他疫霉的tRNA序列,在此基础上设计了一对检测雪松疫霉的特异性引物T1/T2,该对引物从雪松疫霉中扩增得到1条192 bp的条带,而其他15种疫霉和其他真菌菌株均无扩增条带,表明该对引物对雪松疫霉具有特异性。在25μL PCR反应体系中,引物T1/T2检测灵敏度为10 pg基因组DNA;而以引物T3/T4和T1/T2进行巢式PCR扩增,能够检测到1 fg基因组DNA,使检测灵敏度提高了10 000倍。该检测体系对灭菌水中游动孢子的检测灵敏度可达0.5个游动孢子,对人工接种发病的植物组织能够特异性地检测到该病原菌。此外,进一步建立了该病原菌的实时荧光定量PCR检测体系。