适于双向电泳分析的银杏叶绿体蛋白质提取方法

编号 zgly0001535497

文献类型 期刊论文

文献题名 适于双向电泳分析的银杏叶绿体蛋白质提取方法

作者 施大伟  何梅  梁霏霏  徐鸣  谢寅峰 

作者单位 南方现代林业协同创新中心  南京林业大学生物与环境学院  江西省林业科学院 

母体文献 南京林业大学学报(自然科学版 

年卷期 2017年03期

年份 2017 

分类号 S718.3 

关键词 银杏  叶绿体蛋白质组  蛋白质提取方法  双向电泳 

文摘内容 【目的】获得银杏叶绿体蛋白质的提取方法,在蛋白质水平探讨银杏光合作用对环境的响应机制。【方法】建立一种适合银杏叶绿体蛋白双向电泳分离的实验体系,采用Tris-平衡酚抽提法对银杏叶绿体蛋白质进行提取,并与三氯乙酸(TCA)-丙酮沉降法进行对比分析。【结果】Percoll密度梯度离心法适用于银杏叶绿体的提取,提取的叶绿体平均完整率在85%左右。单向电泳结果显示,与TCA-丙酮沉降法相比,在用Tris-平衡酚抽提法分离的叶绿体蛋白质泳道中,低分子质量蛋白质条带更多、更清晰。进一步的双向电泳结果表明,用Tris-平衡酚抽提法对银杏叶绿体蛋白质进行提取,蛋白质产量更高,图谱清晰,所分离的蛋白点更多,形态更好,条纹影响相对较小。【结论】Tris-平衡酚抽提法可有效地提取高质量的叶绿体蛋白质并进行双向电泳,可用于银杏叶绿体的蛋白质组学分析。