粉蚧标本保存与DNA提取方法的比较

编号 zgly0001486819

文献类型 期刊论文

文献题名 粉蚧标本保存与DNA提取方法的比较

作者 魏亦寒  郑斯竹  蔡平  詹国辉  高渊 

作者单位 苏州大学金螳螂建筑与城市环境学院  苏州出入境检验检疫局 

母体文献 应用昆虫学报 

年卷期 2015年04期

年份 2015 

分类号 S433 

关键词 扶桑绵粉蚧  保存方式  DNA提取  CTAB法  磁珠法 

文摘内容 【目的】探讨适合粉蚧的标本保存及DNA提取方法。【方法】采用改良CTAB法、改良SDS法、Gen Mag Bio动物细胞组织/细胞基因组磁珠法以及Gene JET Genomic DNA纯化试剂盒法4种方法分别对新鲜活体4℃、无水乙醇﹣20℃和无水乙醇4℃3种保存方式且保存一年以上的扶桑绵粉蚧Phenacoccus solenopsis成虫进行DNA提取,并对不同提取方法所获取的DNA纯度与质量浓度进行分析比较验证。【结果】3种保存方式中,新鲜活体效果最好,其次为无水乙醇-20℃。无水乙醇4℃效果和无水乙醇﹣20℃无明显区别,均存在一定程度的降解。对于新鲜活体标本,以CTAB法提取的DNA质量最高,其次为Gen Mag Bio磁珠法和SDS法,Gene JET试剂盒法最差;对于无水乙醇﹣20℃和4℃保存时间较长的标本,磁珠法提取的DNA质量明显优于其余3种方法。【结论】无水乙醇﹣20℃可用于粉蚧长期保存,可满足后续分子研究需要;改良CTAB法对新鲜粉蚧成虫DNA提取效果较好,磁珠法对长时间保存DNA存在一定程度降解的粉蚧成虫效果较好。