鸭瘟病毒gB蛋白单克隆抗体的制备

编号 zgly0001534798

文献类型 期刊论文

文献题名 鸭瘟病毒gB蛋白单克隆抗体的制备

作者 赵丹丹  刁有祥  杨国平  陈浩  提金凤  张璐 

作者单位 山东农业大学动物科技学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2016年10期

年份 2016 

分类号 S852.65 

关键词 鸭瘟病毒  gB蛋白  单克隆抗体 

文摘内容 【目的】制备鸭瘟病毒(DPV)gB蛋白单克隆抗体,为建立DPV快速诊断方法及进一步鉴定DPV的抗原表位奠定基础。【方法】克隆DPVgB基因,构建其表达载体并进行原核表达,纯化DPV gB蛋白,以其作为抗原免疫8周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,进行间接ELISA及亚克隆筛选,并对单抗亚类及抗原性进行鉴定。【结果】PCR扩增出915bp的目的基因,成功连接于pET-28a载体,并转化大肠杆菌Rosetta进行诱导表达,获得4株稳定分泌抗DPV gB蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为A8D7、E6C3、H11F8、H6F6,间接ELISA检测其腹水效价分别为1∶103、1∶103、1∶105、1∶103,亚类鉴定结果分别为IgG2b、IgG2a、IgG2b、IgG1,轻链均为kappa链。Western blot结果显示4株单抗均能与DPV gB蛋白特异性结合,IFA结果表明4株单抗是针对DPV产生的。【结论】成功获得了特异性针对DPV gB蛋白的单克隆抗体。