利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人瘦素蛋白

编号 zgly0001399687

文献类型 期刊论文

文献题名 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人瘦素蛋白

作者 陈蔚  付凡  唐顺明  汪生鹏  黄金山  赵巧玲  沈兴家 

作者单位 江苏科技大学  中国农业科学院蚕业研究所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2011年02期

年份 2011 

分类号 S881.2 

关键词 人瘦素蛋白  Bac-to-Bac杆状病毒表达系统  重组杆状病毒  融合蛋白  家蚕 

文摘内容 瘦素(leptin)蛋白由肥胖基因编码,对人体能量代谢等多种生理过程起着重要的调节作用。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人瘦素蛋白基因(lep)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,并转化E.coli DH10Bac,获得重组杆粒Bacmid-lep,然后转染家蚕BmN细胞,获得重组杆状病毒。用SDS-PAGE和Western blotting方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞检测到大小约22 kD的蛋白条带,与预期的人瘦素蛋白分子质量相符。给家蚕5龄起蚕注射重组病毒液后的4～5 d出现发病症状,RT-PCR检测发病家蚕的血液中有lep基因转录,并通过SDS-PAGE和Western blotting检测到大小为22 kD的人瘦素蛋白的表达。研究结果表明,利用Bac-to-Bac表达系统能够获得含有人瘦素蛋白基因的重组杆状病毒,并且目的蛋白能在家蚕细胞及幼虫体内表达。