编号
zgly0000494456
文献类型
期刊论文
文献题名
山茶花叶片DNA提取及RAPD反应体系的研究
学科分类
220.35;野生动物保护与管理
作者单位
浙江师范大学化学与生命科学学院
母体文献
植物研究
年卷期
2007,27(2)
页码
218-223
年份
2007
分类号
S865.39
关键词
山茶花
DNA提取
RAPD
反应体系
文摘内容
山茶花(Camellia japonica L.)是我国特产的名贵花卉之一,由于其品种繁多,在系统分类和品种鉴定上存在一定的难度。本研究针对山茶花的DNA提取方法和RAPD扩增体系进行了摸索,旨在为山茶花在DNA水平的分类鉴定和分子生物学方面研究打下一定的基础。实验采用改进的CTAB法提取山茶花叶片DNA,得到的DNA纯度较高,OD260/OD230值为1.90~2.0,OD260/OD280值为1.80~1.83,得率也较高,一般在150~200μg·g-1左右,片段完整性较好,大于20kb,符合分子遗传实验的要求;在山茶花RAPD扩增条件的研究中,发现20μL反应体系中加入100ng DNA、125 μmol·L-1dNTP(each)、1.2μmol·L-1Mg2+、1×Buffer、0.5μmol·L-1引物、1 U Taq酶最为合适,退火温度一般设为37℃左右,扩增产物的电泳条带数多、清晰、明亮。