小鼠肝炎病毒N蛋白基因在杆状病毒中的表达

编号 zgly0000704757

文献类型 期刊论文

文献题名 小鼠肝炎病毒N蛋白基因在杆状病毒中的表达

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 周洁  宋宇  姜浩  胡建华  高诚 

作者单位 上海实验动物研究中心  上海市实验动物质量监督检验站 

母体文献 实验动物与比较医学 

年卷期 2010(5)

页码 313-317

年份 2010 

分类号 Q95-33 

关键词 小鼠肝炎病毒  N基因  杆状病毒表达 

文摘内容 目的 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小鼠肝炎病毒N基因. 方法 根据GenBank发表的小鼠肝炎病毒A59株N基因序列(AY700211),设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增出N基因的ORF,将目的 片段克隆入pFastBacHTa中,构建重组转移载体pFastBHa-N.将重组质粒转化DH10Bac感受态细菌,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组穿梭载体Bacmid-N.通过脂质体将其转染昆虫细胞Sf9. 结果 获得了重组杆状病毒rBN,并通过Westernblot和IFA分析表明证实N蛋白在昆虫细胞中获得正确表达,且表达产物具有抗原性. 结论 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了小鼠肝炎病毒N蛋白,为进一步进行建立诊断学方法的研究奠定了基础.