党参基因组DNA提取、ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

编号 zgly0001372741

文献类型 期刊论文

文献题名 党参基因组DNA提取、ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

作者 安娜  郭宏波  周铜水  吴千红 

作者单位 西北农林科技大学生命科学学院  复旦大学天然药物研究中心 

母体文献 植物研究 

年卷期 2009年03期

年份 2009 

分类号 R284 

关键词 党参  DNA提取  ISSR-PCR反应体系  引物筛选 

文摘内容 对党参基因组DNA提取方法优化、ISSR体系形成及引物筛选三方面进行探讨,为研究党参居群遗传多样性及药材DNA鉴定奠定基础。经比较改良CTAB法、改进的高盐SDS法和试剂盒三种常用DNA提取方法,发现改良CTAB法效果最佳;利用优化设计并结合有关文献优化ISSR反应体系,最优反应体系为:50μL总反应体积中含约20ng DNA模板,1.25UTaq DNA聚合酶,2.25mmol.L-1Mg2+,200μmol.L-1dNTP,0.50μmol.L-1引物。以此体系为基础进行引物筛选,在100条ISSR引物中筛选出13条扩增条带清晰、多态性较高、重复性好的引物。