家蚕化蛹初期血液中卵黄原蛋白BmVg的纯化和鉴定

编号 zgly0001468527

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕化蛹初期血液中卵黄原蛋白BmVg的纯化和鉴定

作者 罗娟  彭芷昕  陈恩祥  刘红玲  杨从文  沈关望  张海燕  侯勇  林英  夏庆友 

作者单位 家蚕基因组生物学国家重点实验室  农业部蚕桑学重点实验室  西南大学 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  卵黄原蛋白  原核表达  分离纯化  免疫印迹法 

文摘内容 卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)是昆虫血液中发现最早的蛋白质,对于昆虫的繁殖至关重要。以家蚕Vg基因(BmVg)的部分序列构建原核表达载体,转化E.coil BL21(DE3)菌株,在20℃条件下用0.6 mmol/L IPTG进行诱导表达,表达产物经镍柱亲和层析纯化得到家蚕卵黄原蛋白BmVg的肽蛋白。以BmVg肽蛋白为抗原制备的兔源多克隆抗体效价>1∶512 000。采用硫酸铵分级沉淀和阴离子交换层析的纯化方法,从家蚕化蛹初期的血液中纯化获得天然的BmVg蛋白,并用制备的多克隆抗体进行Western blotting检测,鉴定此纯化的天然蛋白质为BmVg蛋白。建立的BmVg分离纯化技术将有助于进一步研究BmVg的合成、转运及利用机制。