山羊痘病毒P32基因的克隆及毕赤酵母中的表达

编号 zgly0001487888

文献类型 期刊论文

文献题名 山羊痘病毒P32基因的克隆及毕赤酵母中的表达

作者 田启会  祁光宇  杨织瑞 

作者单位 甘肃畜牧工程职业技术学院  中农威特生物科技股份有限公司 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S852.654 

关键词 羊痘病毒  P32基因  毕赤酵母  分泌型表达载体  诱导表达  SDS-PAGE  Western blot 

文摘内容 将人工优化合成的山羊痘病毒P32基因和表达载体p PIC9K同时双酶切后相连,构建p PIC9K-IL-2重组表达载体。将线性化的载体p PIC9K-P32电转化毕赤酵母GS115,对重组酵母转化子经MD平板筛选和PCR分析鉴定后,经G418抗性梯度筛选,获得多拷贝重组菌株,甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blot。SDS-PAGE电泳显示出相对分子质量约为30 k Da目的蛋白表达条带,Western blot分析表明表达的蛋白具有反应原性。本研究成功构建载体p PIC9K-P32,并且P32基因已整合到酵母基因组中,为亚单位疫苗和鉴别诊断试剂奠定了基础。