编号
zgly0000707015
文献类型
期刊论文
文献题名
盐爪爪核酸提取方法研究
学科分类
220.1520;林木遗传学
作者单位
内蒙古科技大学数理与生物工程学院
母体文献
中国农学通报
年卷期
2010,26(4)
页码
49-52
年份
2010
分类号
Q943.2
关键词
盐爪爪
核酸
提取方法
RT-PCR
文摘内容
为了提取盐生植物盐爪爪高质量的核酸,为其基因工程研究、实现盐渍土的生物改良以及解决土壤盐渍化这一世界性的生态问题奠定基础,笔者采用CTAB法、SDS法和改良尿素法用于盐爪爪DNA提取,在DNA提取方法的基础上,增加了乙醇和氯化锂特异沉淀步骤用于提取RNA,采用RT-PCR技术验证了该法提取RNA的质量。研究结果显示: 3种DNA提取方法中,SDS法提取DNA的浓度较大,OD260/OD280和OD260/OD230均在正常范围之内;3种RNA提取方法中,SDS-LiCl沉淀法的OD260/OD280在1.8~2.1之间,OD260/OD230大于2.20,说明杂质去除较完全,浓度也较大;以SDS-LiCl沉淀法提取的碱蓬RNA为模板,进行胆碱单加氧酶基因的RT-PCR扩增,能清楚地看到在700~1500bp处有一清晰的扩增条带,并且其扩增量随着不同盐浓度(0、100、250、350、500mmol/L)变化,条带显示由暗到亮再变暗的趋势。确定了SDS法为盐爪爪核酸的最佳提取方法,所得结论为盐爪爪耐盐分子机理的研究奠定了基础,同时为其他植物的核酸提取提供借鉴。