布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究

编号 zgly0001362396

文献类型 期刊论文

文献题名 布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究

作者 宫晓炜  周继章 

作者单位 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2009年12期

年份 2009 

分类号 S852.614 

关键词 布鲁菌  OMP10重组蛋白  抗原性 

文摘内容 设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白omp10的PCR扩增,得到了一个大小为330bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致。将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩增和测序分析,表明重组表达载体构建成功。将此重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,该基因以包涵体的形式在大肠埃希菌中表达,经过包涵体的变性、复性和亲和层析纯化,成功获得大小为14.2ku的融合蛋白,与理论推测的蛋白分子质量一致;Westernblot和间接ELISA试验证明,纯化之后的OMP10重组蛋白可以被布鲁菌阳性血清识别。