细胞接种密度对小鼠iPS细胞诱导效率的影响

编号 zgly0000704682

文献类型 期刊论文

文献题名 细胞接种密度对小鼠iPS细胞诱导效率的影响

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 汪凌波  蒋婧  吕纹简  张璇  李劲松 

作者单位 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 

母体文献 江西农业大学学报 

年卷期 2010,32(5)

页码 868-875

年份 2010 

分类号 Q954.4 

关键词 体细胞重编程  胚胎干细胞  逆转录病毒  诱导多能干细胞 

文摘内容 为研究小鼠胚胎成纤维细胞的接种密度对iPS(induced pluripotent stem,iPS)细胞诱导效率的影响,采用逆转录病毒载体法将Oct4,Sox2,Klf4,c-Myc4个基因或者Oct4,Sox2,Klf43个基因转入到携带有Oct4-EGFP转基因的小鼠胚胎成纤维细胞(Oct4-EGFP mouse embryonic fibroblasts,Oct4-EGFPMEF)中。感染病毒后的第4天将Oct4-EGFPMEF以500～128000个/孔(每孔面积9.6cm2)进行梯度铺盘,并分别于病毒感染后的第12天和第16天对4因子组和3因子组进行碱性磷酸酶染色和Oct4-EGFP阳性细胞比例检测。结果表明,Oct4-EGFPMEF感染病毒后的接种密度对于iPS细胞诱导效率存在较大的影响。4因子和3因子诱导产生iPS细胞的最佳接种密度分别为8000个/孔和32000个/孔。此外,通过逆转录病毒法,在最佳的接种密度下,可顺利地建立起iPS细胞系。