甘薯块根总RNA的高效快速提取方法

编号 zgly0001347765

文献类型 期刊论文

文献题名 甘薯块根总RNA的高效快速提取方法

作者 杨元军  王玉萍  翟红  刘庆昌 

作者单位 中国农业大学植物遗传育种系 农业部作物基因组学与遗传改良重点开放实验室  北京市作物遗传改良重点实验室  教育部作物杂种优势研究与利用重点实验室  中国农业大学植物遗传育种系  农业部作物基因组学与遗传改良重点开放实验室  北京  100094 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2008年01期

年份 2008 

分类号 S531 

关键词 甘薯(Ipomoea batatas(L.)Lam.)  RNA提取  块根  异硫氰酸胍 

文摘内容 甘薯块根富含多糖(主要为淀粉),提取RNA时,二者极易形成胶状沉淀而难以溶解,严重制约了甘薯块根RNA的提取产量和质量,从而影响后续分子生物学的研究。本研究以甘薯新品系农大辐14的块根为材料,采用异硫氰酸胍提取液结合10%(w/v)醋酸钾(KOAc)和1%(w/v)十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)沉淀多糖,在1.5h内完成块根总RNA的提取,平均产量为226μg/gFW,A260/A280值为1.95。提取的总RNA可成功进行单链cDNA的合成和反转录PCR。与已有相关报道相比,该方法在保证总RNA纯度的前提下,产量有所提高,所用时间仅为前人报道的1/3￣1/10。