法克隆紫穗槐4-香豆酸:CoA连接酶全长cDNA(英文)

编号 zgly0001244065

文献类型 期刊论文

文献题名 法克隆紫穗槐4-香豆酸:CoA连接酶全长cDNA(英文)

作者 刘文哲  胡学军  高晓蓉  袁晓东  刘哲  范琦  安利佳 

作者单位 大连理工大学生物工程系  宝生物大连有限公司  大连理工大学生物工程系 大连116029  大连116029  大连116600  大连116029 

母体文献 Forestry Studies in China 

年卷期 2002年01期

年份 2002 

分类号 Q946.2 

关键词 基因克隆  cDNA末端快速扩增PCR  紫穗槐  4-香豆酸:CoA连接酶  木质素 

文摘内容 4 香豆酸 :CoA连接酶 (4CL)是木质素生物合成过程中重要的酶 .该文利用简并寡核苷酸PCR法结合cDNA末端快速扩增PCR法直接获得了紫穗槐 4CLAcDNA全长序列 ,避免了复杂的构建、筛选cDNA文库的过程 .先用简并PCR得到了 4CLA1片段 ,又据此片段设计反向嵌套引物 ,用RACE方法获得未知的 5′和 3′端序列 .所获得的全长 4CLAcDNA ,编码 5 40个氨基酸 .氨基酸序列同源性分析表明4CLA是典型的 4CL蛋白 ,含有预计的AMP binding位点、催化反应区和保守的Cys .