植原体TaqMan探针实时荧光PCR检测鉴定方法的建立

编号 zgly0001249014

文献类型 期刊论文

文献题名 植原体TaqMan探针实时荧光PCR检测鉴定方法的建立

作者 廖晓兰  朱水芳  陈红运  黄文胜  罗宽  赵文军  马荣群  朱建裕 

作者单位 湖南农业大学植保系  国家质检总局动植物检疫实验所  西北农林科技大学  湖南农业大学植保系 长沙410128  北京100029  长沙410128  杨凌712100  长沙410128 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2002年04期

年份 2002 

分类号 S432.4 

关键词 TaqMan探针  实时荧光 PCR  植原体  检测  鉴定 

文摘内容 本研究成功建立了植原体分类鉴定和检测的 Taq Man探针实时荧光 PCR方法 ,该方法根据植原体 16S r DNA保守区设计了 1个 Taq Man广谱探针和 3个植原体组间点突变特异性探针 ,并对 9种植原体和 5种细菌以及 3个植物样本进行实时荧光 PCR。结果表明 ,用广谱探针可检测到所有植原体产生荧光信号 ,而细菌不产生荧光信号。当用植原体组间特异性探针检测时 ,仅能检测到该组植原体产生荧光信号 ,检测的敏感性比常规的 PCR-电泳检测高约 10 0倍、检测速度有较大提高。由于PCR产物是荧光探针检测 ,本方法特异性强 ,并可以用组特异探针直接确定植原体种类。实验采用完全闭管检测 ,降低了污染机会。本研究为其它原核生物、特别是不能培养菌、难培养菌的检测鉴定和分类提供了新方法