家蚕耐氟近等基因系SSH文库的构建及部分差异表达基因的分析

编号 zgly0001399667

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕耐氟近等基因系SSH文库的构建及部分差异表达基因的分析

作者 王小强  徐安英  李刚  张月华  钱荷英  孙平江  郭锡杰 

作者单位 江苏科技大学  中国农业科学院蚕业研究所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2011年01期

年份 2011 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  耐氟性状基因  抑制性消减杂交  同源性分析  实时定量RT-PCR 

文摘内容 为了获取与家蚕耐氟性状相关的基因信息,利用家蚕耐氟品种T6和氟化物敏感品种733新建立耐氟近等基因系,以回交11代的家蚕耐氟近等基因系群体中的耐氟个体和敏感个体的中肠为材料,构建家蚕耐氟近等基因系抑制消减杂交(SSH)cDNA文库。通过对抑制消减杂交cDNA文库中随机挑选的153个阳性克隆测序和聚类拼接,得到19个重叠群(con-tig)、47个已知功能基因(un igene)和28个未知功能基因。获得的表达序列标签(EST)经BLASTx比对和同源性分析,初步发现这些基因参与家蚕体内物质转运、能量代谢、基因转录、蛋白质合成与降解、蛋白质加工、信号转导、机体免疫防御、细胞结构形成等诸多生物学过程。采用实时定量RT-PCR方法,对部分基因在家蚕耐氟近等基因系群体中的耐氟个体和敏感个体的不同组织的表达进行定量分析,发现磷酸根离子转运蛋白基因、三磷酸腺苷(ATP)合成酶基因、液胞型H+-ATP酶基因、脂肪酶基因以及主要过敏原蛋白基因在耐氟个体的中肠、马氏管、脂肪体组织中的表达量有较明显上调。