高效PiggyBac转座酶的构建与筛选

编号 zgly0000980831

文献类型 期刊论文

文献题名 高效PiggyBac转座酶的构建与筛选

作者 张龙  梁明福  张智英 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  西北农林科技大学生命科学学院 

母体文献 西北农林科技大学学报;自然科学版 

年卷期 2015(8)

页码 1-9+18

年份 2015 

关键词 5FOA  转座酶  锌指蛋白 

文摘内容 【目的】构建能够定点转座的高效PiggyBac转座酶系统。【方法】以野生型PiggyBac转座酶为模板,通过易错PCR方法随机突变转座酶基因,构建转座酶突变库,并将其与能够靶向识别并结合DNA序列的锌指蛋白(ZFP)融合表达,构建ZFP-PiggyBac转座酶突变库系统。将转座酶载体突变库、转座子载体和报告载体共转到酿酒酵母JMY1中,通过Ura-5FOA酵母筛选系统筛选高效定点作用的转座酶。【结果】成功构建ZFP-PiggyBac转座酶突变库系统,经过3轮系统筛选获得5个高效作用的突变转座酶。