南阳牛BoLA-DRA基因的克隆及其在大肠埃希菌中的表达

编号 zgly0001382967

文献类型 期刊论文

文献题名 南阳牛BoLA-DRA基因的克隆及其在大肠埃希菌中的表达

作者 楚秋霞  徐照学  施巧婷  陆涛峰  张彦明 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院  河南省农业科学院畜牧兽医研究所 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2010年06期

年份 2010 

分类号 Q785 

关键词 南阳牛  BoLA-DRA  pGEX-4T-1  原核表达 

文摘内容 为克隆南阳牛BoLA-DRA基因,构建原核表达载体并研究该基因在大肠埃希菌中的表达。从南阳牛脾脏组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到BoLA-DRA基因,将其克隆至pGEM-Teasy克隆载体上,转化感受态细胞DH5α,经测序鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建出重组表达质粒,经IPTG诱导表达。结果表明,本试验成功克隆了大小为917 bp的BoLA-DRA基因,重组质粒pGEX-4T-DRA在大肠埃希菌中以包涵体形式表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定大小为54.4 ku,与预期结果一致。为进一步研究该蛋白的功能及制备抗体奠定了基础。