旱柳SRAP-PCR体系的建立与优化

编号 zgly0000720613

文献类型 期刊论文

文献题名 旱柳SRAP-PCR体系的建立与优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 王红玲  张珏  教忠意  隋德宗 

作者单位 江苏省林业科学研究院 

母体文献 浙江林学院学报 

年卷期 2010,27(6)

页码 945-949

年份 2010 

分类号 S722.3 

关键词 林木育种学  旱柳  相关序列扩增多态性(SRAP)  正交实验设计 

文摘内容 为了丰富柳树分子标记的手段,以旱柳Salix matsudana为材料,通过正交实验设计法,获得适于旱柳的相关序列扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)-聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系;对SRAP-PCR扩增过程中的2次退火温度进行优化。结果如下: 优化反应体系,25.00μL反应液中,含20.84nkat的Taq酶,2.00μL Mg2+(25.00mmol·L-1),2.50μL碱基混合物(脱氧核糖核苷酸dNTPs,各2.50mmol·L-1),1.50μL引物(20.00μmol·L-1),100.00ng DNA模板,2.50μL10×Taq酶缓冲液。扩增程序,94℃2.0min;94℃1.0min,38℃1.0min,72℃1.5min,5个循环;94℃1.0min,54℃1.0min,72℃1.5min,30个循环;72℃10.0min。经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测,特征性条带清晰,信息量大,完全可以用于旱柳基因组的研究分析。