CDV、CPV、CAV-2及CPIV多重PCR的建立及应用

编号 zgly0001562209

文献类型 期刊论文

文献题名 CDV、CPV、CAV-2及CPIV多重PCR的建立及应用

作者 刘畅  逄春华  刘存  王静  刘琪  梁琳  袁维峰  钱爱东  崔尚金 

作者单位 吉林农业大学动物科学技术学院  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所  农业部兽用药物与兽医生物技术北京科学观测实验站  青岛机场出入境检验检疫局 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2017年11期

年份 2017 

分类号 S852.65 

关键词 多重PCR  犬瘟热病毒  犬细小病毒  犬腺病毒Ⅱ型  犬副流感病毒 

文摘内容 为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照Gen Bank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法。利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或c DNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好。利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好。利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30)。检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断。