拟南芥中与植物生长和耐寒相关的miRNA表达载体的构建

编号 zgly0000708879

文献类型 期刊论文

文献题名 拟南芥中与植物生长和耐寒相关的miRNA表达载体的构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 蔡杰  杨成龙  段瑞军  郭建春 

作者单位 海南大学农学院  中国热带农业科学院生物技术研究所 

母体文献 基因组学与应用生物学 

年卷期 2010,29(4)

页码 804-808

年份 2010 

分类号 Q943.2 

关键词 miRNA  表达载体  重叠延伸PCR技术  双酶切 

文摘内容 本研究通过PCR方法从拟南芥基因组序列中分离了3个理论推断与耐寒相关的miRNA片段(miRNA402,miRNA319和miRNA393)和1个与植物生长相关的片段miRNA172。利用重叠延伸PCR技术将miRNA172小分子,以及3个与耐寒相关的miRNA402,miRNA319和miRNA393小分子串连在一起分别导入植物表达载体pVKH-35S-GUS-pA,取代表达载体中的GUS基因,构建了pVKH-35S-mir172-pA和pVKH-35S-mir31+402+393-pA融合表达载体。经PCR和双酶切及测序鉴定,pVKH-35S-mir172-pA和pVKH-35S-mir319+402+393-pA构建成功,为后续利用基因工程手段,miRNA转化木薯,提高木薯生长和木薯耐寒相关研究奠定基础。