马铃薯栽培品种‘合作88’细菌人工染色体文库的构建与评价

编号 zgly0000989791

文献类型 期刊论文

文献题名 马铃薯栽培品种‘合作88’细菌人工染色体文库的构建与评价

学科分类 220.20;森林培育学

作者 杨煜  杨晓慧  李灿辉  郭晓  单伟伟  马伟清  黄三文  李广存 

作者单位 山东省农业科学院蔬菜花卉研究所  山东省设施蔬菜分子生物学重点实验室  云南师范大学生命科学学院  中国农业科学院蔬菜花卉研究所 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2015(2)

页码 361-366

年份 2015 

关键词 马铃薯  细菌人工染色体文库  抗病性 

文摘内容 以四倍体马铃薯栽培品种‘合作88’培养12~15 d苗龄的幼嫩叶片为试材,提取高分子量基因组DNA,利用限制性内切酶HindⅢ部分酶切后回收100~300 kb片段,连接到载体Copy ControlTM p CC1BACTM的HindⅢ位点上,构建了细菌人工染色体(BAC)文库。该文库约由850 000个克隆组成,空载率约2.08%,保存在1 700个混合池中,克隆插入片段平均大小约为90 kb,覆盖单倍型马铃薯基因组约85倍。随机挑取6个BAC克隆连续培养5 d,提取DNA进行HindⅢ完全酶切检测,确认不同培养时间的BAC克隆的指纹图谱完全一致,表明文库较好的稳定性。