肿瘤血管生成抑制因子Arresten基因克隆及其对烟草的转化

编号 zgly0001330634

文献类型 期刊论文

文献题名 肿瘤血管生成抑制因子Arresten基因克隆及其对烟草的转化

作者 李红民  郝瑞文  郝建国  贾敬芬 

作者单位 西北大学生命科学学院  山东省日照市科学技术局  西北大学生命科学学院 陕西西安710069  山东日照276826  陕西西安710069 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2007年04期

年份 2007 

分类号 Q943.2 

关键词 肿瘤血管生成抑制因子  Arresten基因  植物表达载体  转化  烟草 

文摘内容 肿瘤血管生成抑制因子Arresten是人Ⅳ型胶原蛋白α1链羧基末端NC1结构域多肽片段,可抑制新血管生成。研究拟实现该基因对烟草细胞的转化,为进一步利用植物细胞表达该蛋白奠定基础。①采用RT-PCR法从人胎盘组织克隆Arresten基因cDNA,克隆产物经酶切后定向插入到植物双元表达载体pCAMBIA1301的NcoⅠ和BstEⅡ位点之间,构建成含有目的基因的植物表达载体pCA,经PCR、限制性内切酶检测及序列测定正确后,转化根癌农杆菌LBA4404,获得携带目的基因的重组农杆菌。②采用叶盘转化法,以重组农杆菌转化烟草。在hygromy cin选择压力下获得烟草转化不定芽和完整植株,经PCR检测初步证实,Arresten基因已导入烟草基因组中。该研究首次将Arresten基因导入高等植物基因组中,为避免利用原核细胞或动物细胞表达Arresten的潜在问题,以及进一步利用植物进行该基因的大规模廉价表达奠定了基础。