运用噬菌体随机肽库筛选与DON毒素特异结合的亲和肽段

编号 zgly0001486521

文献类型 期刊论文

文献题名 运用噬菌体随机肽库筛选与DON毒素特异结合的亲和肽段

作者 邢锦城  张旭  马鸿翔  徐海  侯继波 

作者单位 江苏省农业科学院  江苏省农业生物学重点实验室  江苏沿海地区农业科学研究所  江苏省农业科学院  国家兽用生物制品工程技术研究中心 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2015年02期

年份 2015 

分类号 S432 

关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)  噬菌体展示随机肽库  酶联免疫检测  小麦赤霉病 

文摘内容 为获得与毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)高亲和力的特异性多肽,利用丁基硼酸封闭法制备DON人工抗原DON-HG-BSA,以其为靶分子筛选噬菌体肽库,对阳性克隆进行DNA序列测定与氨基酸推导,并进行亲和特异性验证。结果显示,经过4轮亲和肽段筛选与酶联免疫检测法鉴定,从M13噬菌体随机7肽库中得到15个DON人工抗原包被孔与牛血清白蛋白包被孔OD比值大于3.8的阳性克隆,其中10个与DON人工抗原高亲和力结合的阳性克隆经测序后共推导出4种多肽序列。经抗原梯度酶联免疫检测法验证,多肽MAPGWVP与DON人工抗原浓度的相关性高达0.99,对人工抗原具有高亲和力。该多肽的获得将为进一步开发高效的DON诊断试剂盒奠定基础。