阴沟肠杆菌(nifL- A~c) 工程菌株的构建

编号 zgly0001211086

文献类型 期刊论文

文献题名 阴沟肠杆菌(nifL- A~c) 工程菌株的构建

作者 邱德义  沈炳福 

作者单位 中国科学院上海植物生理研究所!上海200032上海市计划生育科学研究所200032  中国科学院上海植物生理研究所!上海200032 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 1999年03期

年份 1999 

分类号 Q782 

关键词 基因表达  nifL  nifA  阴沟肠杆菌 

文摘内容 采用基因定位突变的方法，在体外把来自ｐＢＲ３２２ 的四环素抗性（Ｔｃｒ） 基因片段插入由ｐＳＴ１１４２ 质粒所携带的阴沟肠杆菌ｎｉｆＬ基因３’ 端的Ｓｍａ Ⅰ位点，再经细胞体内同源基因片段的重组交换，选择获得了在染色体上ｎｉｆＬ突变的阴沟肠杆菌Ｅ１２ 和Ｅ１３ ，两者Ｔｃｒ 基因插入ｎｉｆＬ的转录方向相反。经分析显示，Ｅ１３（ ｎｉｆＬ－ ） 由于Ｔｃｒ 基因插入后，在ｎｉｆＡ上游产生具有启动子功能的核苷酸序列（ ＴＴＴＣＡＴＡ ） ，激活ｎｉｆＡ 的表达。当Ｅ１３ 和Ｅ１２ 被引入多拷贝组成型ｎｉｆＡ 质粒ｐＢＦ１０１后，在有氨条件下ｎｉｆ 基因去阻遏表达，呈高的固氮酶活力，与野生型Ｅ２６（ｐＢＦ１０１） 比较，其比活力提高近１ 倍