角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析

编号 zgly0001400423

文献类型 期刊论文

文献题名 角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析

作者 吴刘成  刘春  蒋荧梅  王生存  邵义祥 

作者单位 南通大学实验动物中心  南通大学比较医学研究所 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年04期

年份 2011 

分类号 Q78  S858.91 

关键词 B6-Co突变系小鼠  Map3k1基因  PCR扩增  序列分析 

文摘内容 对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增目的基因,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,质粒DNA分子提取,电泳检测,EcoRⅠ酶切释放目的片段,送上海生工生物工程技术服务有限公司测序。成功扩增出Map3k1基因的20个外显子和上游调控序列,B6-Co小鼠测序结果与基因组数据库序列比对,该基因位于13号染色体第112 559 574的碱基由T突变为A,编码的蛋白质第314氨基酸由亮氨酸变为谷氨酸,但是该基因的表达调控及蛋白质剪切机制仍有待深入研究。