落羽杉属树木基因组总DNA的提取及SRAP反应体系的优化

编号 zgly0000634485

文献类型 期刊论文

文献题名 落羽杉属树木基因组总DNA的提取及SRAP反应体系的优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 於朝广  殷云龙 

作者单位 江苏省中国科学院植物研究所南京中山植物园 

母体文献 基因组学与应用生物学 

年卷期 2009,28(1)

页码 109-114

年份 2009 

分类号 Q781  S792.14 

关键词 落羽杉属  DNA提取  SRAP—PCR  体系优化 

文摘内容 本文针对落羽杉属植物组织中多糖、多酚等次生物质含量高的特点，对其基因组DNA提取方法进行研究，比较了SDS法、CTAB法提取落羽杉属植物基因组DNA的效果，结果表明：CTAB法提取效果较佳。在此基础上，利用正交设计法，对SRAP反应体系中的各个主要影响因子Mg^2＋．dNTP、引物、TaqDNA聚合酶进行了优化筛选，确立了适合落羽杉属植物SRAP-PCR反应的最佳体系，即10μL体系中含有1μL 10×PCR bufier，Mg^2＋2．0mmol／L，dNTP100μmol／L，引物0-3μmol／L，彻DNA聚合酶0．5U和50ng模板DNA。利用该优化体系，通过48对SRAP引物组合对2个落羽杉属植物（落羽杉和墨杉）及4个杂交后代进行SRAP扩增，结果发现，SRAP引物及优化后的反应体系能够有效地用于落羽杉属植物种质资源鉴定及遗传多样性分析等研究。