百脉根ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001627481

文献类型 期刊论文

文献题名 百脉根ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 富新年  师尚礼  王赞  李俊  闫洪唯 

作者单位 甘肃农业大学草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/甘肃省草业工程实验室/中-美草地畜牧业可持续发展研究中心  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 

母体文献 草原与草坪 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 S541.6 

关键词 百脉根  ISSR  反应体系  优化 

文摘内容 运用L16(45)正交设计对百脉根ISSR反应的5个因素,即DNA模板浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶浓度在4个水平上进行优化实验,通过不同反应体系扩增效果比较,最终确定在20uL体系中各反应物的最适含量为:40ng模板DNA、2μL 10×PCR Buffer、0.15mmol/LdNTPs、0.75μmol/L ISSR引物、1.5mmol/L MgCl2、1UTaqDNA聚合酶。该体系的建立为今后利用ISSR技术进行百脉根属种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础。