灵芝lz8基因的克隆和原核表达及LZ-8蛋白的免疫印迹检测

编号 zgly0001316947

文献类型 期刊论文

文献题名 灵芝lz8基因的克隆和原核表达及LZ-8蛋白的免疫印迹检测

作者 丁一新  赵明文 

作者单位 南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室  南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室 南京210095  南京210095 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2006年04期

年份 2006 

分类号 S567.31 

关键词 载体构建  异源表达  Western杂交 

文摘内容 根据已报道的lz8基因序列设计引物,以灵芝基因组DNA为模板,PCR扩增获得lz8基因。构建了原核表达载体pET30a-lz8,转化原核表达宿主菌RosettaDE3,IPTG诱导融合蛋白表达,并用Ni-NTA亲和层析柱对LZ-8蛋白进行分离纯化。将纯化的LZ-8蛋白用Freund佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内,经数次加强免疫后采血分离抗血清,并以抗血清为探针建立了LZ-8蛋白的免疫印迹法定性检测方法。